Fermentation submergée de Streptomyces uncialis fournissant une plate-forme biotechnologique pour la biosynthèse, l’ingénierie et la production de l’incialamycine

Fermentation submergée de Streptomyces uncialis fournissant une plate-forme biotechnologique pour la biosynthèse, l'ingénierie et la production de l'incialamycine

L’oncialamycine (UCM) appartient à la sous-famille fusionnée à l’anthraquinone des produits naturels enediyne à 10 membres qui présente une cytotoxicité extraordinaire contre un large spectre de lignées cellulaires cancéreuses humaines. Les conjugués anticorps-médicament (ADC), utilisant des analogues synthétiques de l’UCM comme charge utile, sont en développement préclinique. L’UCM est exclusivement produit par Streptomyces uncialis DCA2648 sur milieu gélose solide à faibles titres (∼0,019 mg / L), limitant son apport par fermentation microbienne et entravant ses études de biosynthèse et d’ingénierie par la manipulation des voies in vivo.

Nous rapportons ici les conditions de culture qui permettent la manipulation génétique de la biosynthèse UCM in vivo et permettent la production d’UCM, avec des titres améliorés, par fermentation submergée des souches de S. uncialis modifiées. Ces résultats mettent en évidence une plate-forme biotechnologique pour la biosynthèse, l’ingénierie et la production d’UCM qui devrait faciliter à la fois ses études fondamentales et ses applications translationnelles.

Plus précisément, le titre d’UCM a été amélioré de près de 58 fois à ∼1,1 mg / L grâce à la combinaison de la suppression de grappes de gènes biosynthétiques codant pour des métabolites non liés du type sauvage de S. uncialis, la mutagenèse chimique et la manipulation de régulateurs spécifiques de la voie pour les souches de S. uncialis, et enfin l’optimisation moyenne de ces dernières pour la production d’UCM. La manipulation génétique de la biosynthèse de l’UCM a été démontrée en inactivant des gènes sélectionnés dans les souches modifiées de S. uncialis, dont l’une a donné une souche mutante accumulant la tiancimycine B, un intermédiaire biosynthétique commun connu pour la sous-famille de produits naturels d’énediyne fusionnés à l’anthraquinone.

Applications de la bioluminescence en biotechnologie et au-delà

La bioluminescence est le phénomène naturel fascinant par lequel les créatures vivantes produisent de la lumière. La bioluminescence se produit lorsque l’oxydation d’une luciférine à petite molécule est catalysée par une enzyme luciférase pour former une espèce à l’état excité qui émet de la lumière. Il existe plus de 30 systèmes bioluminescents connus, mais les paires luciférine-luciférase de seulement 11 systèmes ont été caractérisées à ce jour, tandis que d’autres nouveaux systèmes sont actuellement à l’étude. Les différentes paires luciférine-luciférase ont des longueurs d’onde d’émission de lumière différentes et sont donc adaptées à diverses applications.

La dernière décennie environ a vu de grands progrès dans l’ingénierie des protéines, la chimie synthétique et la physique qui ont permis aux luciférines et aux luciférases d’atteindre des applications jusqu’alors inexplorées. La réaction de bioluminescence est désormais couramment utilisée pour les dosages géniques, la détection des interactions protéine-protéine, le criblage à haut débit (HTS) dans la découverte de médicaments, le contrôle de l’hygiène, l’analyse de la pollution dans les écosystèmes et l’imagerie in vivo chez les petits mammifères. S’éloignant de la détection et de l’imagerie, les faits saillants les plus récents des applications de la bioluminescence en biomédecine comprennent le photodécage induit par la bioluminescence de petites molécules

la thérapie photodynamique basée sur la bioluminescence (PDT) et l’utilisation de la bioluminescence pour contrôler les neurones. Il y a également eu une augmentation de la recherche sur le ciel bleu telle que l’ingénierie de diverses usines émettrices de lumière. Cela a conduit à de nombreuses sciences multidisciplinaires passionnantes dans diverses disciplines. Cette revue se concentre sur les applications passées, présentes et futures de la bioluminescence. Nous visons à rendre cette revue accessible à tous les chimistes pour comprendre comment ces applications ont été développées et sur quoi elles reposent, en termes simples et compréhensibles pour un chimiste diplômé.

Les informations génomiques ont révélé que la capacité exceptionnelle de synthèse de produits naturels par A. terreus reste à explorer davantage. Avec les progrès de la stratégie d’extraction du génome, les produits de plusieurs grappes de gènes biosynthétiques cryptiques ont été découverts récemment. En outre, une série d’études d’ingénierie métabolique ont été réalisées dans les souches industrielles de lovastatine et d’acide itaconique pour améliorer encore les processus de production. Cette revue présente les progrès actuels et les perspectives d’avenir dans le domaine de la biotechnologie A. terreus.

Fermentation submergée de Streptomyces uncialis fournissant une plate-forme biotechnologique pour la biosynthèse, l'ingénierie et la production de l'incialamycine

Une caractérisation multi-omique du stress thermique dans une souche de Scenedesmus halotolérante pour la biotechnologie algale

Les microalgues convertissent efficacement la lumière du soleil en lipides et en glucides, offrant des alternatives biosourcées pour la production d’énergie et de produits chimiques. L’amélioration de la productivité et de la robustesse des algues contre le stress abiotique nécessite une caractérisation au niveau des systèmes permise par la génomique fonctionnelle. Ici, nous caractérisons une microalgue halotolérante Scenedesmus sp. NREL 46B-D3 démontrant un pic de croissance près de 25 ° C qui atteint 30 g / m2 / jour et la plus grande capacité d’accumulation de biomasse après la division cellulaire rapportée à ce jour pour une souche halotolérante.

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Description: Minimum order quantity: 1 unit of 1EA

Gel-FAST? Gel Staining/Destaining Kit

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Gel Tray

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Gel Tray

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Description: Aluminium Hydroxide Gel 2%, Aluminum salt Vaccine adjuvant.

Gel tray L

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Description: 2pcs/1set

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Sodium Pyruvate Solution, 100 mM Solution

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Stop Solution

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DTT Solution

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Denaturing solution

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AlphaBioCoat Solution

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Tartrazine Solution

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Orcein Solution

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Hybridization Solution

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Blocking Solution

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Gentamicin Solution, Gentamicin Solution, 50 mg/mL

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Gel DNA Recovery Kit

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Gel DNA Recovery Kit

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EUR 130

L’analyse de la génomique fonctionnelle a révélé que les gènes impliqués dans la production de lipides, les canaux ioniques et les antiporteurs sont développés et exprimés. L’exposition au stress thermique modifie le métabolisme des acides gras et augmente la synthèse des acides aminés. L’analyse de co-expression montre que de nombreux gènes de biosynthèse d’acides gras sont surexprimés avec des facteurs de transcription spécifiques sous stress froid. Ces gènes et d’autres impliqués dans la réponse métabolique et régulatrice au stress thermique peuvent être explorés plus avant pour l’amélioration de la souche.